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酶聯(lián)免疫法嘔吐毒素檢測(cè)操作步驟

  • 發(fā)布日期:2019-08-23      瀏覽次數(shù):1155
    • 試劑盒靈敏度:3ppb(ng/ml)

      檢測(cè)下限:

      谷物、飼料…………………………150ppb

      谷物(大米、玉米、小米等)及飼料前處理方法

      1)稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中,加10ml去離子水,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;

      2)取0.1ml上清,加入0.9ml復(fù)溶液,混勻;

      3)取50μl進(jìn)行分析。

       

      酶聯(lián)免疫操作步驟:

      6.1 編    號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

      6.2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光反應(yīng)30分鐘。

      6.3 洗    滌:將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,后用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。

      6.4 加酶反應(yīng):加酶標(biāo)記物100µl/孔,37℃避光反應(yīng)30分鐘。

      6.5 洗    滌:同上

      6.6 顯    色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光顯色15分鐘(若藍(lán)色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間)。

      6.7 終    止:加終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。

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